武漢貝科新肽科技有限公司
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原位雜交第三天
1） 用1ml含10％熱滅清的MABT溶液置換溶液，放置搖床上25分鐘，然后用1mlMABT置換，25分鐘，再用1mlMABT溶液置換，一小時(shí)以上，后用1mlMABT溶液置換，25分鐘。
2） 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次，每次放置五分鐘。
3）將胚胎轉(zhuǎn)入十六孔板中，吸去staining buffer，加上300ul BM Purple AP Substrate(底物，用之前加5mM左旋米唑)，十六孔板外面包上錫箔紙以避光，避免搖動(dòng)，室溫下顯色。
4）每隔一小時(shí)觀察胚胎是否開(kāi)始顯色
5）將顯色完全的胚胎中的底物吸出，用PBST洗兩三次后加上4％多聚甲醛固定，拍照。
6）4C冰箱保存。
原位雜交技術(shù)還在以下生物領(lǐng)域有應(yīng)用：
細(xì)胞化學(xué)和學(xué)：原位雜交技術(shù)可以用于研究細(xì)胞內(nèi)特定化學(xué)物質(zhì)的定位和分布，例如檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)酶、、神經(jīng)遞質(zhì)等物質(zhì)的分布和定位。此外，還可以應(yīng)用于學(xué)研究，例如檢測(cè)細(xì)胞、分子的分布和定位等。
神經(jīng)科學(xué)：在神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域，原位雜交技術(shù)常被用于研究神經(jīng)元的生長(zhǎng)、發(fā)育和連接等過(guò)程。例如，通過(guò)標(biāo)記特定基因的探針，可以檢測(cè)神經(jīng)元中特定基因的表達(dá)和定位，進(jìn)而研究其在神經(jīng)信號(hào)傳遞、神經(jīng)環(huán)路形成等方面的作用。
植物原位雜交在遺傳育種方面的應(yīng)用主要包括：
檢測(cè)物種或品種特異性：通過(guò)植物原位雜交技術(shù)可以檢測(cè)出不同物種或品種之間基因表達(dá)的差異，從而為物種或品種特異性研究提供依據(jù)。
遺傳育種：通過(guò)植物原位雜交技術(shù)可以檢測(cè)到不同品種之間基因表達(dá)的差異，從而為遺傳育種提供重要的參考信息。例如，通過(guò)將特定的外源基因?qū)氲街参锛?xì)胞中，然后利用原位雜交技術(shù)檢測(cè)該基因在植物細(xì)胞中的位置和表達(dá)情況，為遺傳育種提供重要的參考信息。
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